Dlaczego zaczynamy obserwacje mikroskopowe od najmniejszego powiększenia to ważne pytanie dla tych, którzy chcą się nauczyć korzystać z mikroskopu. Odpowiedź na to pytanie jest różna w zależności od rodzaju mikroskopu, którego będziesz używał. Mikroskop stereoskopowy lub złożony będzie miał różne współczynniki powiększenia i być może będziesz musiał dostosować swoje obserwacje do sprzętu, którego używasz.
Mikroskop rozpraszający
Przy rozpoczynaniu obserwacji mikroskopowych powinniśmy wziąć pod uwagę następujące kwestie: co zamierzamy oglądać, jak dużego powiększenia potrzebujemy, jaki jest wymagany kontrast i czy mikroskop, którym dysponujemy, pozwoli nam zrobić to, co chcemy. Im większe powiększenie, tym więcej czasu i wysiłku trzeba będzie poświęcić, aby osiągnąć pożądane rezultaty.
Jak każde urządzenie elektroniczne, mikroskop może tworzyć bardzo dokładne obrazy, ale nie będzie ich tworzył przez cały czas. Dlatego właściciele powinni przeczytać instrukcję obsługi przed użyciem sprzętu.
Najlepsze mikroskopy posiadają elementy sterujące, które pozwalają na regulację natężenia światła, kształtu wiązki światła i oświetlacza. Umożliwia to oglądanie obiektu w najbardziej odpowiednim powiększeniu.
Mikroskop stereoskopowy lub złożony
Obserwacja przy najmniejszym powiększeniu jest kluczowym krokiem w kalibracji i kontroli poziomu powiększenia. Całkowite powiększenie mikroskopu jest określane przez pomnożenie powiększenia okularu i obiektywu.
Mikroskopy stereoskopowe oferują szeroki zakres powiększeń. Zazwyczaj mają zakres powiększenia od 2 do 70 razy. Jednak mikroskopy badawcze wyższej klasy mogą osiągać powiększenie 500x. Niektóre stereomikroskopy posiadają również funkcję zoomu.
Zmiana mocy zoomu w stereomikroskopie może wpłynąć na jego powiększenie i pole widzenia. Może również zmienić odległość roboczą instrumentu. Ponieważ funkcja ta jest nieliniowa, trudno jest obliczyć zmiany. Na przykład, jeśli zwiększysz powiększenie okularu z 20x do 30x, będziesz musiał zwiększyć odległość roboczą.
Powiększenie liniowe
W przypadku mikroskopii istnieje standardowa zasada. Obserwacje powinieneś zacząć od najmniejszego powiększenia obiektywu. Jest to najprostszy sposób na rozpoczęcie obserwacji. Jednak większe powiększenia mogą onieśmielać początkujących.
Na wielkość powiększenia wpływają dwa główne czynniki: poziom oświetlenia i apertura numeryczna obiektu. Jeśli chcesz mieć dobrą rozdzielczość, będziesz potrzebował dużej apertury numerycznej. Z drugiej strony, jeśli masz małą aperturę numeryczną, możesz mieć problem ze znalezieniem okazu.
Apertura numeryczna jest określana skrótem NA. Waha się ona od 0,1 dla obiektywu o małym powiększeniu do 1,6 dla obiektywu o dużej wydajności. Choć nie jest to tak proste jak zmierzenie liczby pikseli na ekranie, jest dobrym wskaźnikiem rozdzielczości oglądanego obrazu.
Zapobieganie tworzeniu się pęcherzyków powietrza pod mikroskopem
Pęcherzyki powietrza nie są przyjemne dla oka. Mogą być jednak przydatne dla niektórych organizmów i służyć jako źródło tlenu. Niestety, mogą też powodować uszkodzenia hodowli komórkowych i przeszczepów chemicznych. Oto kilka wskazówek, jak nie dopuścić do powstania bąbelków.
Po pierwsze, trzymaj okaz w wodzie. Dzięki temu łatwiej będzie zobaczyć komórki. Istnieją komercyjne urządzenia, które mogą to zrobić za Ciebie. W rzeczywistości dobrym sposobem jest umieszczenie pipety z wodą na próbce. Możesz też umieścić kroplę alkoholu. Uważaj, żeby nie wyparował, bo inaczej będziesz miał śliską próbkę.
Następnym krokiem jest zatrzymanie pęcherzyków powietrza za pomocą szkiełka nakrywkowego. Szkiełko nakrywkowe to kawałek szkła, który utrzymuje próbkę na miejscu. Jego nazwa pochodzi od funkcji, jaką pełni. Możesz go kupić w lokalnym sklepie z artykułami laboratoryjnymi. Upewnij się, że kupiłeś taki, który jest ustawiony pod kątem do wewnątrz, a jego jedna krawędź dotyka szkiełka. Idealnie byłoby położyć szkiełko nakrywkowe pod kątem 45 stopni, gdyż zminimalizuje to powstawanie pęcherzyków powietrza.
Obliczanie całkowitego powiększenia
Używanie mikroskopu wymaga znajomości sposobu obliczania całkowitego powiększenia. Dokonuje się tego przez pomnożenie mocy powiększenia obiektywu i okularu. Można je również obliczyć dla mikroskopu cyfrowego. Możesz skorzystać z wytycznych, aby określić zakres użytecznych wartości powiększenia.
Podstawowy mikroskop edukacyjny można zazwyczaj kupić z trzema obiektywami. Moc powiększenia wynosi zazwyczaj od 400x do 1000x. Aby obliczyć całkowite powiększenie wizualne, potrzebny jest dodatkowy czynnik uwzględniający różnice w ogniskowych obiektywów.
Zwykle maksymalne użyteczne powiększenie jest określane przez aperturę numeryczną systemu. Może się ona różnić w zależności od producenta i wieku mikroskopu.
Kiedy obliczasz całkowite powiększenie wizualne, upewnij się, że uwzględniasz ustawienie powiększenia. Zmiana pokrętła zoomu na korpusie mikroskopu zmniejszy lub zwiększy pole widzenia.